Čisto olje Saposhnikovia divaricata za izdelavo sveč in mila, eterično olje za difuzorje na debelo, novo za difuzorje za gorilnike s trstiko

kratek opis:

2.1. Priprava SDE

Korenike SD so bile kupljene kot posušeno zelišče pri Hanherb Co. (Guri, Koreja). Rastlinske materiale je taksonomsko potrdil dr. Go-Ya Choi s Korejskega inštituta za orientalsko medicino (KIOM). Vzorec vavčerja (številka 2014 SDE-6) je bil deponiran v korejskem herbariju standardnih zeliščnih virov. Posušene korenike SD (320 g) smo dvakrat ekstrahirali s 70% etanolom (z 2-urnim refluksom) in ekstrakt nato koncentrirali pod znižanim tlakom. Odvarek smo filtrirali, liofilizirali in shranili pri 4 °C. Dobitek posušenega ekstrakta iz surovih izhodnih materialov je bil 48,13 % (m/m).

2.2. Kvantitativna analiza s tekočinsko kromatografijo visoke ločljivosti (HPLC).

Kromatografsko analizo smo izvedli s sistemom HPLC (Waters Co., Milford, MA, ZDA) in detektorjem fotodiodnih nizov. Za HPLC analizo SDE je prim.O- standard glukozilcimifugina je bil kupljen pri Korejskem inštitutu za promocijo tradicionalne medicine (Gyeongsan, Koreja) insek-O-glukozilhamaudol in 4'-O-β-D-glukozil-5-O-metilvisaminol smo izolirali v našem laboratoriju in identificirali s spektralnimi analizami, predvsem z NMR in MS.

Vzorce SDE (0,1 mg) smo raztopili v 70 % etanolu (10 ml). Kromatografsko ločevanje smo izvedli s kolono XSelect HSS T3 C18 (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, ZDA). Mobilna faza je bila sestavljena iz acetonitrila (A) in 0,1 % ocetne kisline v vodi (B) pri pretoku 1,0 ml/min. Uporabljen je bil večstopenjski gradientni program, kot sledi: 5 % A (0 min), 5–20 % A (0–10 min), 20 % A (10–23 min) in 20–65 % A (23–40 min). ). Valovna dolžina detekcije je bila skenirana pri 210–400 nm in zabeležena pri 254 nm. Injekcijski volumen je bil 10,0μL. Standardne raztopine za določanje treh kromonov smo pripravili pri končni koncentraciji 7,781 mg/mL (prim.O-glukozilcimifugin), 31,125 mg/ml (4′-O-β-D-glukozil-5-O-metilvisaminol) in 31,125 mg/ml (sek-O-glukozilhamaudol) v metanolu in hranimo pri 4 °C.

2.3. Ocena protivnetnega delovanjaIn vitro

2.3.1. Celična kultura in obdelava vzorcev

Celice RAW 264.7 so bile pridobljene iz ameriške zbirke tipskih kultur (ATCC, Manassas, VA, ZDA) in gojene v mediju DMEM, ki je vseboval 1 % antibiotikov in 5,5 % FBS. Celice smo inkubirali v vlažni atmosferi s 5 % CO2 pri 37 °C. Za stimulacijo celic smo medij nadomestili s svežim medijem DMEM in lipopolisaharidom (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, ZDA) pri 1.μg/ml smo dodali v prisotnosti ali odsotnosti SDE (200 ali 400μg/ml) dodatnih 24 ur.

2.3.2. Določanje dušikovega oksida (NO), prostaglandina E2 (PGE2), faktorja tumorske nekroze-α(TNF-α) in proizvodnja interlevkina-6 (IL-6).

Celice smo obdelali s SDE in stimulirali z LPS 24 ur. Proizvodnja NO je bila analizirana z merjenjem nitrita z uporabo Griessovega reagenta v skladu s prejšnjo študijo [12]. Izločanje vnetnih citokinov PGE2, TNF-α, IL-6 pa je bil določen z uporabo kompleta ELISA (sistemi za raziskave in razvoj) v skladu z navodili proizvajalca. Učinke SDE na proizvodnjo NO in citokinov so določili pri 540 nm ali 450 nm z uporabo Wallac EnVision™čitalec mikroplošč (PerkinElmer).

2.4. Ocena aktivnosti antiosteoartritisaIn Vivo

2.4.1. Živali

Samci podgan Sprague-Dawley (stari 7 tednov) so bili kupljeni pri Samtako Inc. (Osan, Koreja) in nameščeni v nadzorovanih pogojih z 12-urnim ciklom svetloba/tema pri°C in% vlažnosti. Podgane so dobile laboratorijsko prehrano in vodoad libitum. Vsi eksperimentalni postopki so bili izvedeni v skladu s smernicami Nacionalnega inštituta za zdravje (NIH) in odobreni s strani Odbora za nego živali in uporabo univerze Daejeon (Daejeon, republika Koreja).

2.4.2. Indukcija OA z MIA pri podganah

Živali so bile randomizirane in razvrščene v skupine za zdravljenje pred začetkom študije (na skupino). Raztopina MIA (3 mg/50μ0,9 % fiziološke raztopine) je bil neposredno injiciran v intraartikularni prostor desnega kolena pod anestezijo, inducirano z mešanico ketamina in ksilazina. Podgane so bile naključno razdeljene v štiri skupine: (1) skupina s fiziološko raztopino brez injekcije MIA, (2) skupina z MIA z injekcijo MIA, (3) skupina, zdravljena s SDE (200 mg/kg) z injekcijo MIA in (4 ) skupina, zdravljena z indometacinom (IM-) (2 mg/kg) z injekcijo MIA. Podganam so dajali oralno SDE in IM 1 teden pred injiciranjem MIA 4 tedne. Odmerki SDE in IM, uporabljeni v tej študiji, so temeljili na tistih, uporabljenih v prejšnjih študijah [10,13,14].

2.4.3. Meritve porazdelitve nosilnosti zadnje šape

Po indukciji OA je bilo prvotno ravnotežje v nosilnosti zadnjih tac porušeno. Za ovrednotenje sprememb tolerance nosilnosti je bil uporabljen tester nezmožnosti (Linton instrumentation, Norfolk, Združeno kraljestvo). Podgane smo previdno dali v merilno komoro. Nosilna sila, ki jo izvaja zadnja okončina, je bila povprečena v obdobju 3 s. Razmerje porazdelitve teže je bilo izračunano z naslednjo enačbo: [teža desnega zadnjega uda/(teža desnega zadnjega uda + teža levega zadnjega uda)] × 100 [15].

2.4.4. Meritve ravni citokinov v serumu

Vzorce krvi smo centrifugirali pri 1500 g 10 minut pri 4 °C; nato smo serum zbrali in shranili pri –70 °C do uporabe. Ravni IL-1β, IL-6, TNF-αin PGE2 v serumu smo izmerili s kompleti ELISA podjetja R&D Systems (Minneapolis, MN, ZDA) v skladu z navodili proizvajalca.

2.4.5. Kvantitativna RT-PCR analiza v realnem času

Celotno RNK smo ekstrahirali iz tkiva kolenskega sklepa z uporabo TRI reagenta® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, ZDA), reverzno prepisali v cDNA in pomnožili s PCR z uporabo kompleta TM One Step RT PCR s SYBR green (Applied Biosystems). , Grand Island, NY, ZDA). Kvantitativni PCR v realnem času je bil izveden s sistemom Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR (Applied Biosystems, Grand Island, NY, ZDA). Zaporedja primerjev in zaporedje sonde so prikazani v tabeli1. Alikvote vzorčnih cDNA in enako količino cDNA GAPDH smo pomnožili z glavno mešanico TaqMan® Universal PCR, ki je vsebovala DNA polimerazo, v skladu z navodili proizvajalca (Applied Biosystems, Foster, CA, ZDA). Pogoji PCR so bili 2 minuti pri 50 °C, 10 minut pri 94 °C, 15 s pri 95 °C in 1 minuta pri 60 °C za 40 ciklov. Koncentracijo ciljnega gena smo določili s primerjalno metodo Ct (število cikla praga na presečni točki med grafom pomnoževanja in pragom) v skladu z navodili proizvajalca.

FOB cena:0,5–9999 USD/kos

Min.Order količina:100 kosov/kosov

Zmogljivost dobave:10000 kosov/kosov na mesec

Pošljite nam e-pošto

Podrobnosti o izdelku

Oznake izdelkov

Osteoartritis (OA) je najpogostejša mišično-skeletna bolezen in najpogostejša degenerativna bolezen sklepov pri starejših.1]. OA je stanje, ki ga delno povzroči poškodba, izguba strukture in delovanja hrustanca ter disregulacija vnetnih in protivnetnih poti [2,3]. Prizadene predvsem sklepni hrustanec in subhondralno kost sinovialnih sklepov ter povzroči odpoved sklepov, kar povzroči bolečino pri prenašanju teže, vključno s hojo in stanjem [4].

Za OA ni zdravila, saj je hrustanec, ko je uničen, zelo težko obnoviti [5]. Cilji zdravljenja so lajšanje bolečin, ohranjanje ali izboljšanje gibljivosti sklepov, povečanje moči sklepov in zmanjšanje invalidnih učinkov bolezni. Namen farmakološkega zdravljenja OA je zmanjšati bolečino, da se izboljša bolnikovo delovanje sklepov in kakovost življenja. Čeprav je uničenje hrustanca glavni dogodek pri osteoartritisu, je razgradnja kolagena temeljni dogodek, ki določa nepopravljivo napredovanje osteoartritisa v povezavi z vnetjem.6,7]. Zdravljenja s protivnetnim in hondroprotektivnim delovanjem naj bi lajšala bolečino in ohranjala celovitost matriksa pri bolnikih z OA.

Zato bo zmanjšanje vnetja verjetno koristno pri zdravljenju osteoartritisa. Nedavne študije kažejo na zaščitno vlogo rastlinskih virov pri napredovanju osteoartritisa v smislu ublažitve vnetja hondrocitov in nadaljnjega uničenja hrustanca prek njihove sposobnosti interakcije s tkivi, povezanimi s sklepi, kar ima za posledico ublažitev bolečine v sklepih.8].

Koren izSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) se pogosto uporablja v tradicionalni medicini za zdravljenje glavobola, bolečine, vnetja in artritisa v Koreji in na Kitajskem [9,10]. Različni farmakološki učinkiSaposhnikovia divaricata(SD) vključujejo tudi protivnetne, analgetične, antipiretične in antiartritične lastnosti [9,11]. Nedavna študija je pokazala, da ima izvleček kromona SD možne učinke proti revmatoidnemu artritisu pri mišjem modelu artritisa, ki ga povzroča kolagen [10]; vendar je bilo izvedenih nekaj študij, ki bi podprle protivnetno in antiartritisno delovanjeSaposhnikovia divaricataizvleček (SDE).

Zato je ta študija raziskala protivnetno in antiosteoartritisno delovanje 70-odstotnega etanolnega ekstrakta SD. Najprej so ovrednotili protivnetni učinek SDEin vitrov celicah RAW 264.7, ki jih povzroči LPS. Nato smo izmerili antiosteoartritisni učinek SDE z ocenjevanjem porazdelitve nosilnosti, razgradnje sklepnega hrustanca in vnetnih odzivov pri podganjem modelu OA, povzročenega z mononatrijevim jodoacetatom (MIA).